HPLC

En modern self-contained HPLC

HPLC (engelska high-performance liquid chromatography eller tidigare high pressure liquid chromatography) eller högupplösande vätskekromatografi är en separationsmetod för kemiska föreningar, som används för att separera, identifiera och kvantifiera specifika komponenter i blandningar. Blandningarna kan härröra från livsmedel, kemikalier, läkemedel,[1] biologiska, miljö - och jordbruk etc. som har lösts upp i flytande lösningar.

Schematisk presentation av en HPLC-enhet (1) Behållare med lösningsmedel. Olika beroende på vilka föreningar man vill lösa upp, (2) Filter som tar bort luftbubblor, (3) Ventil där man ställer in proportionerna mellan de olika lösningsmedlen, (4) Blandningsreservoar, (5) Högtryckspump, (6) Växel där man ställer in inmatningsläge, respektive arbetsläge, (7) Här injiceras materialet som skall separeras i dess beståndsdelar, (8) Utbytbart kolonnfilter där smuts fastnar, vilket ökar man analysfiltrets livslängd, (9) 10–500 mm långt analysfilter, (10) Detektor som ser vad som kommer ur kolonnen, oftast med hjälp av IR- eller UV-ljus (11) Insamling av mätvärden, (12) Uppsamlingskärlet byts efter hand så man får olika innehåll i olika behållare.

Den använder sig av högtryckspumpar, som levererar blandningar av olika lösningsmedel, kallad den mobila fasen, som strömmar genom systemet, samlar provblandningen på vägen, levererar den till en cylinder, kallad kolonnen, fylld med fasta partiklar, gjord av adsorberande material, som kallas den stationära fasen.[2] Varje komponent i provet interagerar på olika sätt med det adsorberande materialet, vilket orsakar olika migrationshastigheter för varje komponent.[3] Dessa olika hastigheter leder till separation när arterna strömmar ut ur kolonnen till en specifik detektor som UV-detektorer. Utsignalen från detektorn är en graf, som kallas ett kromatogram. Kromatogram är grafiska representationer av signalintensiteten mot tid eller volym, som visar toppar, som representerar komponenter i provet. Varje prov visas i sin respektive tid, kallad dess retentionstid, med area proportionell mot dess mängd.[2]

HPLC används i stor utsträckning för tillverkning (till exempel under tillverkningsprocessen av farmaceutiska och biologiska produkter),[4][5] rättsligt (till exempel för att upptäcka prestationshöjande läkemedel i urin),[6] forskning (till exempel att separera komponenterna i komplexa biologiska prov eller liknande syntetiska kemikalier från varandra), och medicinska ändamål (till exempel detektering av vitamin D-nivåer i blodserum).[7] Kromatografi kan beskrivas som en massöverföringsprocess som involverar adsorption och/eller separation. Som nämnts förlitar sig HPLC på pumpar för att passera en trycksatt vätska och en provblandning genom en kolonn fylld med adsorbent, vilket leder till separation av provkomponenterna. Den aktiva komponenten i kolonnen, adsorbenten, är vanligtvis ett granulärt material tillverkat av fasta partiklar (till exempel kiseldioxid, polymerer, etc.), 1,5–50 μm i storlek, på vilket olika reagenser kan bindas.[8][9] Komponenterna i provblandningen är separerade från varandra på grund av deras olika grader av interaktion med adsorbentpartiklarna. Den trycksatta vätskan är typiskt en blandning av lösningsmedel (till exempel vatten, buffertar, acetonitril och/eller metanol) och kallas "rörlig fas". Dess sammansättning och temperatur spelar en stor roll i separationsprocessen genom att påverka interaktionerna mellan provkomponenter och adsorbent.[10] Dessa interaktioner är fysiska till sin natur, som hydrofoba (dispersiva), dipol-dipol och joniska, oftast i en kombination.[11][12]

Drift

Vätskekromatografen är komplex[13] och har sofistikerad och delikat teknik. För att systemet ska fungera korrekt bör det finnas ett minimum av förståelse för hur enheten utför databehandlingen för att undvika felaktiga data och förvrängda resultat.[14][15][16] HPLC skiljer sig från traditionell ("lågtrycks") vätskekromatografi eftersom driftstrycken är betydligt högre (cirka 50–1 400 bar), medan vanlig vätskekromatografi vanligtvis förlitar sig på tyngdkraften för att passera den mobila fasen genom den packade kolonnen. På grund av den lilla provmängden som separeras i analytisk HPLC är typiska kolonndimensioner 2,1–4,6 mm diameter och 30–250 mm längd. Även HPLC-kolonner är gjorda med mindre adsorbentpartiklar (1,5–50 μm i genomsnittlig partikelstorlek). Detta ger HPLC överlägsen upplösningsförmåga (förmågan att skilja mellan föreningar) vid separering av blandningar, vilket gör det till en populär kromatografisk teknik.

Historik och utveckling

Före HPLC använde forskare vätskekromatografiska tekniker för bänkkolonn. Vätskekromatografiska system var i stort sett ineffektiva på grund av att flödeshastigheten för lösningsmedel var beroende av gravitationen. Separationer tog många timmar, och ibland dagar att slutföra. Gaskromatografi (GC) vid den tiden var mera effektiv än vätskekromatografi (LC), men det var uppenbart att gasfasseparation och analys av mycket polära biopolymerer med hög molekylvikt var omöjliga.[17] GC var ineffektivt för många biovetenskapliga och hälsotillämpningar för biomolekyler, eftersom de för det mesta är icke-flyktiga och termiskt instabila vid de höga temperaturerna i GC.[18] Som ett resultat antogs alternativa metoder som snart skulle resultera i utvecklingen av HPLC.

Efter Martin och Synges banbrytande arbete 1941, förutspåddes det av Calvin Giddings,[19] Josef Huber och andra på 1960-talet att LC kunde drivas i högeffektivt läge genom att minska packningspartikeldiametern avsevärt under den typiska LC (och GC) nivån på 150 μm och använda tryck för att öka den mobila fasens hastighet.[17] Dessa förutsägelser genomgick omfattande experiment och förfining under hela 1960-talet till 1970-talet och fram till idag.[20] Tidig utvecklingsforskning började förbättra LC-partiklar, till exempel den historiska Zipax, en ytligt porös partikel.[21] 1970-talet medförde mycket utveckling inom hårdvara och instrumentering. Forskare började använda pumpar och injektorer för att göra en rudimentär design av ett HPLC-system.[22] Gasförstärkarpumpar var idealiska eftersom de arbetade vid konstant tryck och inte krävde läckagefria tätningar eller backventiler för jämnt flöde och bra kvantifiering.[18] Hårdvarumilstolpar gjordes vid Dupont IPD (Industrial Polymers Division) som en gradientanordning med låg uppehållsvolym som användes samt att septuminjektorn ersattes med en slinginsprutningsventil.[18]

Medan instrumentutvecklingen var viktig, handlar HPLC:s historia främst om partikelteknologins historia och utveckling.[18][23] Efter introduktionen av porösa lagerpartiklar har det funnits en stadig trend mot minskad partikelstorlek för att förbättra effektiviteten.[18] Men vid minskning av partikelstorleken uppstod nya problem. De praktiska nackdelarna härrör från det alltför stora tryckfall som behövs för att tvinga mobil fluid genom kolonnen och svårigheten att förbereda en enhetlig packning av extremt finkorniga material.[24] Varje gång partikelstorleken minskas avsevärt krävs en ny omgång av instrumentutveckling vanligtvis för att hantera trycket.[20][18]

Tillämpningar

Tillverkning

HPLC har många tillämpningar inom både laboratorie- och klinisk verksamhet. Det är en vanlig teknik som används inom läkemedelsutveckling, eftersom det är ett pålitligt sätt att erhålla och säkerställa produktens renhet.[25] Även om HPLC kan producera extremt högkvalitativa (rena) produkter, är det inte alltid den primära metoden som används vid tillverkning av bulkläkemedelsmaterial.[26] Enligt den europeiska farmakopén används HPLC i endast 15,5 procent av synteserna.[27] Emellertid spelar det en roll i 44 procent av synteserna i USA:s farmakopé.[28] Detta kan möjligen bero på skillnader i monetära och tidsmässiga begränsningar, eftersom HPLC i stor skala kan vara en dyr teknik. En ökning av specificitet, precision och noggrannhet som sker med HPLC motsvaras tyvärr av en ökning av kostnaden.

Rättslig

Tekniken används också för att upptäcka olagliga droger i olika prover.[29] Den vanligaste metoden för att upptäcka droger har varit en immunanalys.[30] Denna metod är mycket bekvämare. Bekvämlighet kommer dock på bekostnad av specificitet och täckning av ett brett spektrum av läkemedel, varför HPLC har använts som en alternativ metod. Eftersom HPLC är en metod för att bestämma (och möjligen öka) renhet, var användningen av enbart HPLC för att utvärdera koncentrationer av läkemedel något otillräcklig. Därför utförs HPLC i detta sammanhang ofta tillsammans med masspektrometri.[31] Genom att använda vätskekromatografi-masspektrometri (LC-MS) istället för gaskromatografi-masspektrometri (GC-MS) kringgås behovet av derivatisering med acetylerings- eller alkyleringsmedel, vilket kan vara ett betungande extra steg.[32] LC-MS har använts för att upptäcka en mängd olika medel som dopningsmedel, drogmetaboliter, glukuronidkonjugat, amfetamin, opioider, kokain, BZD, ketamin, LSD, cannabis och bekämpningsmedel.[33][34] Att utföra HPLC i samband med masspektrometri minskar det absoluta behovet av standardisering av HPLC-experimentkörningar.

Forskning

Liknande analyser kan utföras för forskningsändamål, för att upptäcka koncentrationer av potentiella kliniska kandidater som antisvamp- och astmaläkemedel.[35] Denna teknik är naturligtvis också användbar för att observera flera arter i insamlade prover, men kräver användning av standardlösningar när information om artidentitet söks. Det används som en metod för att bekräfta resultat av syntesreaktioner, eftersom renhet är avgörande i denna typ av forskning. Men masspektrometri är fortfarande det mer tillförlitliga sättet att identifiera arter.

Medicin och hälsovetenskap

Medicinsk användning av HPLC använder vanligtvis masspektrometer (MS) som detektor, så tekniken kallas LC-MS[36] eller LC-MS/MS för tandem-MS, där två typer av MS används sekventiellt.[37] Farmaceutiska tillämpningar[38] är de största användarna av HPLC, LC-MS och LC-MS/MS.[39] Detta inkluderar läkemedelsutveckling[40] och farmakologi, som är den vetenskapliga studien av läkemedels och kemikaliers effekter på levande organismer,[41] personlig medicin,[42] folkhälsa[43][44] och diagnostik.[45] Medan urin är det vanligaste mediet för att analysera läkemedelskoncentrationer, är blodserum provet som samlas in för de flesta medicinska analyser med HPLC.[46] En av de viktigaste rollerna för LC-MS och LC-MS/MS i det kliniska labbet är Newborn Screening (NBS) för metabola störningar[47] och uppföljningsdiagnostik.[48][49] Spädbarnsproverna kommer i form av torkad blodfläck (DBS),[50] som är enkel att förbereda och transportera, vilket möjliggör säker och tillgänglig diagnostik, både lokalt och globalt.

Andra metoder för detektering av molekyler som är användbara för kliniska studier har testats mot HPLC, nämligen immunanalyser. I ett exempel på detta jämfördes kompetitiva proteinbindningsanalyser (CPBA) och HPLC för känslighet vid detektion av vitamin D. Användbart för att diagnostisera vitamin D-brister hos barn fann man att sensitiviteten och specificiteten för denna CPBA endast nådde 40 respektive 60 procent av HPLC:s kapacitet.[51] Även om det är ett dyrt verktyg, är noggrannheten hos HPLC nästan oöverträffad.

Se även

Referenser

Den här artikeln är helt eller delvis baserad på material från engelskspråkiga Wikipedia, 5 september 2024.

Noter

  1. ^ Kazakevich, Yuri, red (2007). HPLC for pharmaceutical scientists. Hoboken, NJ: Wiley-Interscience. ISBN 978-0-471-68162-5. 
  2. ^ [a b] ”Chromatography”. web.njit.edu. https://web.njit.edu/~kebbekus/analysis/4CHROMAT.htm. 
  3. ^ Chaitali Dattatray Harde1, Dr. Amol Navnath Khedkar, Vaishnavi Sanjay Sake. ”Review on High Performance Liquid Chromatography”. Review on High Performance Liquid Chromatography. https://www.ijnrd.org/papers/IJNRD2310315.pdf. 
  4. ^ Levin, Shulamit (January 2004). ”Reversed Phase Stationary Phases in Pharmaceutical Sciences” (på engelska). Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies 27 (7–9): sid. 1353–1376. doi:10.1081/JLC-120030606. ISSN 1082-6076. https://www.tandfonline.com/doi/full/10.1081/JLC-120030606. 
  5. ^ Gerber, F.; Krummen, M.; Potgeter, H.; Roth, A.; Siffrin, C.; Spoendlin, C. (2004). ”Practical aspects of fast reversed-phase high-performance liquid chromatography using 3μm particle packed columns and monolithic columns in pharmaceutical development and production working under current good manufacturing practice”. Journal of Chromatography A 1036 (2): sid. 127–133. doi:10.1016/j.chroma.2004.02.056. PMID 15146913. 
  6. ^ Bayne, Shirley; Carlin, Michelle (2017). Forensic Applications of High Performance Liquid Chromatography (1st). CRC Press. ISBN 9780429251962. 
  7. ^ Seger, Christoph; Salzmann, Linda (2020-08-01). ”After another decade: LC–MS/MS became routine in clinical diagnostics”. Clinical Biochemistry. Advancement and Applications of Mass Spectrometry in Laboratory Medicine 82: sid. 2–11. doi:10.1016/j.clinbiochem.2020.03.004. ISSN 0009-9120. PMID 32188572. 
  8. ^ Unger, K. K., red. (1979-01-01), Chapter 5 Silica columns–packing procedures and performance characteristics, Journal of Chromatography Library, "16", Elsevier, s. 169–186, doi:10.1016/S0301-4770(08)60809-X, ISBN 978-0-444-41683-4, https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S030147700860809X, läst 5 augusti 2024 
  9. ^ Xu, Yan; Cao, Qing; Svec, Frantisek; Fréchet, Jean M.J. (2010-04-15). ”Porous polymer monolithic column with surface-bound gold nanoparticles for the capture and separation of cysteine-containing peptides”. Analytical Chemistry 82 (8): sid. 3352–3358. doi:10.1021/ac1002646. ISSN 0003-2700. PMID 20302345. 
  10. ^ Panella, Cristina; Ferretti, Rosella; Casulli, Adriano; Cirilli, Roberto (2019-10-01). ”Temperature and eluent composition effects on enantiomer separation of carvedilol by high-performance liquid chromatography on immobilized amylose-based chiral stationary phases”. Journal of Pharmaceutical Analysis 9 (5): sid. 324–331. doi:10.1016/j.jpha.2019.04.002. ISSN 2095-1779. PMID 31929941. 
  11. ^ ”Molecular Interaction of HPLC Stationary Phase”. www.imtakt.com. https://www.imtakt.com/jp/Products/Interaction/indexE.htm. 
  12. ^ Kadlecová, Zuzana; Kalíková, Květa; Folprechtová, Denisa; Tesařová, Eva; Gilar, Martin (2020-08-16). ”Method for evaluation of ionic interactions in liquid chromatography”. Journal of Chromatography A 1625: sid. 461301. doi:10.1016/j.chroma.2020.461301. ISSN 0021-9673. PMID 32709344. https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0021967320305793. 
  13. ^ Dong, Michael (2018). ”Ten Common-Sense Corollaries in Pharmaceutical Analysis by High Performance Liquid Chromatography” (på engelska). LCGC Europe. LCGC Europe-08-01-2018 31 (8): sid. 432–436. https://www.chromatographyonline.com/view/ten-common-sense-corollaries-pharmaceutical-analysis-high-performance-liquid-chromatography. 
  14. ^ Snyder, Lloyd R.; Kirkland, Joseph J.; Glajch, Joseph L. (2012). Practical HPLC Method Development (2nd). John Wiley & Sons. 
  15. ^ McMaster, Marvin C. (2007). HPLC: a practical user's guide (2nd). Hoboken, NJ: Wiley-Interscience. ISBN 978-0-471-75401-5. 
  16. ^ Hanai, Toshihiko; Hanai, T. (1999). HPLC: a practical guide. RSC chromatography monographs. Royal Society of Chemistry. Cambridge: Royal Society of Chemistry. ISBN 978-0-85404-515-0. 
  17. ^ [a b] Karger, Barry L. (1997). ”HPLC: Early and Recent Perspectives”. Journal of Chemical Education 74 (1): sid. 45. doi:10.1021/ed074p45. Bibcode: 1997JChEd..74...45K. 
  18. ^ [a b c d e f] Henry, Richard A. (1 February 2009) "The Early Days of HPLC at Dupont" Arkiverad 1 augusti 2020 hämtat från the Wayback Machine. Arkiverad 2020-08-01. Chromatography Online. Avanstar Communications Inc.
  19. ^ Giddings, Calvin (1965). Dynamics of Chromatography: Principles and Theory. Marcel Dekker. 
  20. ^ [a b] Levin, Shulamit (2017). Grinberg, Nelu. red. Solid-Core or Fully Porous Columns in Ultra High-Performance Liquid Chromatography—Which Way to Go for Better Efficiency of the Separation?. Advances in Chromatography. "55" (1). Boca Raton: CRC Press. Sid. 185–203. ISBN 9781315158075. 
  21. ^ Iler, R.K. (1979) The Chemistry of Silica. John Wiley & Sons. New York.
  22. ^ Karger, B. L.; Berry, L. V. (1971). ”Rapid liquid-chromatographic separation of steroids on columns heavily loaded with stationary phase”. Clin. Chem. 17 (8): sid. 757–64. doi:10.1093/clinchem/17.8.757. PMID 4254537. 
  23. ^ Neue, Uwe D. (1997). HPLC columns: theory, technology, and practice. New York, NY: Wiley VCH. ISBN 978-0-471-19037-0. 
  24. ^ Giddings, J. Calvin (1965) Dynamics of Chromatography, Part I. Principles and Theory. Marcel Dekker, Inc., New York. p. 281.
  25. ^ Gerber, Frederic (May 2004). ”Practical aspects of fast reversed-phase high-performance liquid chromatography using 3 μm particle packed columns and monolithic columns in pharmaceutical development and production working under current good manufacturing practice”. Journal of Chromatography 1036 (2): sid. 127–33. doi:10.1016/j.chroma.2004.02.056. PMID 15146913. 
  26. ^ Siddiqui, Masoom Raza; AlOthman, Zeid A.; Rahman, Nafisur (2013). ”Analytical techniques in pharmaceutical analysis: A review”. Arabian Journal of Chemistry 10: sid. S1409–S1421. doi:10.1016/j.arabjc.2013.04.016. 
  27. ^ The European Pharmacopoeia, 2002. fourth ed., Council of Europe, Strasbourg.
  28. ^ United States Pharmacopoeia, 2004. 27th ed. The USP Convention Inc., Rockville, MD.
  29. ^ Merone, Giuseppe M.; Tartaglia, Angela; Rossi, Sandra; Santavenere, Francesco; Bassotti, Elisa; D'Ovidio, Cristian; Bonelli, Martina; Rosato, Enrica; et al. (2021). ”Fast Quantitative LC-MS/MS Determination of Illicit Substances in Solid and Liquid Unknown Seized Samples” (på engelska). Analytical Chemistry 93 (49): sid. 16308–16313. doi:10.1021/acs.analchem.1c03310. ISSN 0003-2700. PMID 34843645. 
  30. ^ Pesce, Amadeo; Rosenthal, Murray; West, Robert; West, Cameron; Crews, Bridgit; Mikel, Charles; Almazan, Perla; Latyshev, Sergey (2010-06-01). ”An evaluation of the diagnostic accuracy of liquid chromatography-tandem mass spectrometry versus immunoassay drug testing in pain patients”. Pain Physician 13 (3): sid. 273–281. PMID 20495592. http://www.painphysicianjournal.com/current/pdf?article=MTM1MQ%3D%3D&journal=55. 
  31. ^ Tsai, I.-Lin; Weng, Te-I.; Tseng, Yufeng J.; Tan, Happy Kuy-Lok; Sun, Hsiao-Ju; Kuo, Ching-Hua (2013-12-01). ”Screening and confirmation of 62 drugs of abuse and metabolites in urine by ultra-high-performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry”. Journal of Analytical Toxicology 37 (9): sid. 642–651. doi:10.1093/jat/bkt083. PMID 24084874. 
  32. ^ Weinmann, W.; Renz, M.; Vogt, S.; Pollak, S. (2000-01-01). ”Automated solid-phase extraction and two-step derivatisation for simultaneous analysis of basic illicit drugs in serum by GC/MS”. International Journal of Legal Medicine 113 (4): sid. 229–235. doi:10.1007/s004149900098. PMID 10929239. 
  33. ^ Kolmonen, Marjo; Leinonen, Antti; Pelander, Anna; Ojanperä, Ilkka (2007-02-28). ”A general screening method for doping agents in human urine by solid phase extraction and liquid chromatography/time-of-flight mass spectrometry”. Analytica Chimica Acta 585 (1): sid. 94–102. doi:10.1016/j.aca.2006.12.028. PMID 17386652. Bibcode: 2007AcAC..585...94K. 
  34. ^ Pelander, Anna; Ojanperä, Ilkka; Laks, Suvi; Rasanen, Ilpo; Vuori, Erkki (2003-11-01). ”Toxicological screening with formula-based metabolite identification by liquid chromatography/time-of-flight mass spectrometry”. Analytical Chemistry 75 (21): sid. 5710–5718. doi:10.1021/ac030162o. PMID 14588010. 
  35. ^ Nobilis, Milan; Pour, Milan; Senel, Petr; Pavlík, Jan; Kunes, Jirí; Voprsalová, Marie; Kolárová, Lenka; Holcapek, Michal (2007-06-15). ”Metabolic profiling of a potential antifungal drug, 3-(4-bromophenyl)-5-acetoxymethyl-2,5-dihydrofuran-2-one, in mouse urine using high-performance liquid chromatography with UV photodiode-array and mass spectrometric detection”. Journal of Chromatography B 853 (1–2): sid. 10–19. doi:10.1016/j.jchromb.2007.02.045. PMID 17400036. 
  36. ^ Gu, Jatin; Patel, Kumar; Shah, Dhiren (2016). ”APPLICATION OF LC-MS” (på engelska). PharmaTutor. https://www.pharmatutor.org/articles/application-liquid-chromatography-mass-spectrometry. 
  37. ^ Tallam, Anil Kumar; Alapati, Sahithi; Nuli, Mohana Vamsi (2023). ”A review on bioanalytical method development and validation of anticancer drugs by using lc/ms/ms and its applications on routine analysis” (på engelska). Journal of Integral Sciences: sid. 4–19. doi:10.37022/jis.v6i1.51. ISSN 2581-5679. https://www.jisciences.com/index.php/journal/article/view/51. 
  38. ^ O'Driscoll, Aimee (2021). ”HPLC in Pharmaceutical Applications” (på engelska). Lab Manager. https://www.labmanager.com/hplc-in-pharmaceutical-applications-25323. 
  39. ^ Beccaria, Marco; Cabooter, Deirdre (2020). ”Current developments in LC-MS for pharmaceutical analysis” (på engelska). Analyst 145 (4): sid. 1129–1157. doi:10.1039/C9AN02145K. ISSN 1364-5528. PMID 31971527. Bibcode: 2020Ana...145.1129B. https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2020/an/c9an02145k. 
  40. ^ Gu, Chunang (Christine); Russell, David; Yehl, Peter (2016). ”Application of LCMS in small-molecule drug development” (på engelska). European Pharmaceutical Review 21 (4): sid. 54–57. https://www.europeanpharmaceuticalreview.com/article/43628/application-lcms-small-molecule-drug-development/. 
  41. ^ D'Ovidio, Cristian; Locatelli, Marcello; Perrucci, Miryam; Ciriolo, Luigi; Furton, Kenneth G.; Gazioglu, Isil; Kabir, Abuzar; Merone, Giuseppe Maria; et al. (2023). ”LC-MS/MS Application in Pharmacotoxicological Field: Current State and New Applications” (på engelska). Molecules 28 (5): sid. 2127. doi:10.3390/molecules28052127. ISSN 1420-3049. PMID 36903374. 
  42. ^ Zhou, Juntuo; Zhong, Lijun (2022). ”Applications of liquid chromatography-mass spectrometry based metabolomics in predictive and personalized medicine”. Frontiers in Molecular Biosciences 9. doi:10.3389/fmolb.2022.1049016. ISSN 2296-889X. PMID 36406271. 
  43. ^ Mathias, Patricia I.; Connor, Thomas H.; B'Hymer, Clayton (2017). ”A review of high performance liquid chromatographic-mass spectrometric urinary methods for anticancer drug exposure of health care workers”. Journal of Chromatography B 1060: sid. 316–324. doi:10.1016/j.jchromb.2017.06.028. ISSN 1570-0232. PMID 28654869. 
  44. ^ Hernández, Félix; Sancho, Juan V.; Ibáñez, María; Guerrero, Carlos (2007). ”Antibiotic residue determination in environmental waters by LC-MS”. TrAC Trends in Analytical Chemistry. Pharmaceutical-residue analysis 26 (6): sid. 466–485. doi:10.1016/j.trac.2007.01.012. ISSN 0165-9936. https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0165993607000295. 
  45. ^ Seger, Christoph; Salzmann, Linda (2020). ”After another decade: LC–MS/MS became routine in clinical diagnostics”. Clinical Biochemistry. Advancement and Applications of Mass Spectrometry in Laboratory Medicine 82: sid. 2–11. doi:10.1016/j.clinbiochem.2020.03.004. ISSN 0009-9120. PMID 32188572. 
  46. ^ Sundström, Mira; Pelander, Anna; Angerer, Verena; Hutter, Melanie; Kneisel, Stefan; Ojanperä, Ilkka (2013-10-01). ”A high-sensitivity ultra-high performance liquid chromatography/high-resolution time-of-flight mass spectrometry (UHPLC-HR-TOFMS) method for screening synthetic cannabinoids and other drugs of abuse in urine”. Analytical and Bioanalytical Chemistry 405 (26): sid. 8463–8474. doi:10.1007/s00216-013-7272-8. PMID 23954996. 
  47. ^ Gelb, Michael H.; Basheeruddin, Khaja; Burlina, Alberto; Chen, Hsiao-Jan; Chien, Yin-Hsiu; Dizikes, George; Dorley, Christine; Giugliani, Roberto; et al. (2022). ”Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry in Newborn Screening Laboratories” (på engelska). International Journal of Neonatal Screening 8 (4): sid. 62. doi:10.3390/ijns8040062. ISSN 2409-515X. PMID 36547379. 
  48. ^ Wang, Yanyun; Sun, Yun; Jiang, Tao (2019). ”Clinical Application of LC–MS/MS in the Follow-Up for Treatment of Children with Methylmalonic Aciduria” (på engelska). Advances in Therapy 36 (6): sid. 1304–1313. doi:10.1007/s12325-019-00955-0. ISSN 1865-8652. PMID 31049874. https://doi.org/10.1007/s12325-019-00955-0. 
  49. ^ Arunkumar, Nivethitha; Langan, Thomas J.; Stapleton, Molly; Kubaski, Francyne; Mason, Robert W.; Singh, Rajendra; Kobayashi, Hironori; Yamaguchi, Seiji; et al. (2020). ”Newborn screening of mucopolysaccharidoses: past, present, and future” (på engelska). Journal of Human Genetics 65 (7): sid. 557–567. doi:10.1038/s10038-020-0744-8. ISSN 1435-232X. PMID 32277174. https://www.nature.com/articles/s10038-020-0744-8. 
  50. ^ Skogvold, Hanne Bendiksen; Rootwelt, Helge; Reubsaet, Léon; Elgstøen, Katja Benedikte Prestø; Wilson, Steven Ray (2023). ”Dried blood spot analysis with liquid chromatography and mass spectrometry: Trends in clinical chemistry” (på engelska). Journal of Separation Science 46 (15): sid. e2300210. doi:10.1002/jssc.202300210. ISSN 1615-9306. PMID 37269205. https://analyticalsciencejournals.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/jssc.202300210. 
  51. ^ Zahedi Rad, Maliheh; Neyestani, Tirang Reza; Nikooyeh, Bahareh; Shariatzadeh, Nastaran; Kalayi, Ali; Khalaji, Niloufar; Gharavi, Azam (2015-01-01). ”Competitive Protein-binding assay-based Enzyme-immunoassay Method, Compared to High-pressure Liquid Chromatography, Has a Very Lower Diagnostic Value to Detect Vitamin D Deficiency in 9–12 Years Children”. International Journal of Preventive Medicine 6: sid. 67. doi:10.4103/2008-7802.161069. PMID 26330983. 

Vidare läsning

  • L. R. Snyder, J.J. Kirkland, and J. W. Dolan, Introduction to Modern Liquid Chromatography, John Wiley & Sons, New York, 2009.
  • M.W. Dong, Modern HPLC for practicing scientists. Wiley, 2006.
  • L. R. Snyder, J.J. Kirkland, and J. L. Glajch, Practical HPLC Method Development, John Wiley & Sons, New York, 1997.
  • S. Ahuja and H. T. Rasmussen (ed), HPLC Method Development for Pharmaceuticals, Academic Press, 2007.
  • S. Ahuja and M.W. Dong (ed), Handbook of Pharmaceutical Analysis by HPLC, Elsevier/Academic Press, 2005.
  • Y. V. Kazakevich and R. LoBrutto (ed.), HPLC for Pharmaceutical Scientists, Wiley, 2007.
  • U. D. Neue, HPLC Columns: Theory, Technology, and Practice, Wiley-VCH, New York, 1997.
  • M. C. McMaster, HPLC, a practical user's guide, Wiley, 2007.

Externa länkar

  • Wikimedia Commons har media som rör HPLC.
Auktoritetsdata

Media som används på denna webbplats

Agilent1200HPLC.jpg
Författare/Upphovsman: http://en.wikipedia.org/wiki/User:Kommando, Licens: CC BY-SA 3.0
View of an Agilent 1200 High-performance liquid chromatography (HPLC) system with automatic sample carriage, quaternary pump, multiple wavelength detector and no column fitted, connected via ethernet to a PC.
HPLC apparatus.svg
Författare/Upphovsman: Den här W3C-overifiera vektorbilden skapades med Inkscape ., Licens: CC BY-SA 3.0
Schematic representation of an HPLC unit.
(1) Solvent reservoirs, (2) Solvent degasser, (3) Gradient valve, (4) Mixing vessel for delivery of the mobile phase, (5) High-pressure pump, (6) Switching valve in "inject position", (6') Switching valve in "load position", (7) Sample injection loop, (8) Pre-column (guard column), (9) Analytical column, (10) Detector (i.e. IR, UV), (11) Data acquisition, (12) Waste or fraction collector.