GFP Superresolution Christoph Cremer

Författare/Upphovsman:

Andy Nestl

Tillskrivning:

Bilden är taggad "Attribution Required" men ingen tillskrivningsinformation lämnades. Attributionsparametern utelämnades troligen när MediaWiki-mallen användes för CC-BY-licenserna. Författare och upphovsmän hittar ett exempel för korrekt användning av mallarna här.

Kreditera:

Eget arbete

Kort länk:

https://sewiki.info/b/49973

Källa:

Wikimedia Commons

Upplösning:

538 x 389 Pixel (160159 Bytes)

Beskrivning:

GFP superresolution, optical nanoscopy ( Christoph Cremer, emeritus at Heidelberg university ^[1])

View of a nucleus of a bone cancer cell: using normal high resolution fluorescence microscopy, it is not possible to distinguish details of its structure (image on the left). Using the two Color Localization Microscopy 2CLM (image on the right) it is possible to localize 70,000 histone molecules (red: RFP-H2A) and 50,000 chromatin remodeling proteins (green: GPF-Snf2H) in a field of view of 470 µm2 with an optical depth of 600 nm. Common fluorescence markers were used.

2CLM is the only optical nanoscopy method that allows position based co-localization of single molecules at high density in a wide field of view using conventional fluorescent proteins such as GFP, YFP, RFP, or other conventional fluorochromes.

Due to its high optical single molecule resolution, 2CLM allows significantly more precise analyses of potential protein interactions than FRET-(Fluorescence Resonance Energy Transfer) technology, which is at present the preferred method for such investigations. This is of particular significance in studies of biomolecular machines (BMMs) within cells: Single BMMS can be analysed, including the number of molecules of a given type; distances between proteins in these BMMs often are substantially greater than those that can be analyzed by FRET (restricted to a maximum distance of only a few nm).

Possible to use conventional, well established and inexpensive fluorescent dyes, from the GFP group, and its dye variants, to the well-known Alexa and fluorescein dyes. Fundamental to SPDMphymod are blinking phenomena (flashes of fluorescence), induced by reversible bleaches (metastable dark states). Individual molecules of the same spectral emission color can be detected.

Publikation: Manuel Gunkel, Fabian Erdel, Karsten Rippe, Paul Lemmer, Rainer Kaufmann, Christoph Hörmann, Roman Amberger and Christoph Cremer: Dual color localization microscopy of cellular nanostructures. In: Biotechnology Journal, 2009, 4, 927-938. ISSN 1860-6768

Licens:

CC BY-SA 3.0

Licenskommentaren:

Detta verk är fritt och kan användas av vem som helst i vilket syfte som helst. Du behöver inget tillstånd för att använda det här innehållet, så länge du följer eventuella licenskrav som anges på den här sidan. Wikimedia har tagit emot e-post som bekräftar att upphovsrättsinnehavaren har godkänt publicering under de villkor som nämns på den här sidan. Korrespondensen har granskats av en betrodd volontär och sparats i vårt arkiv. Korrespondensen är tillgänglig för betrodda volontärer med ärendenummer 2011011110013541. Frågor angående den arkiverade korrespondensen kan ställas på VRT noticeboard. Ärendelänk: https://ticket.wikimedia.org/otrs/index.pl?Action=AgentTicketZoom&TicketNumber=2011011110013541 Find other files from the same ticket:

Licensvillkor:

Creative Commons Attribution-Share Alike 3.0